利用 DNA 指纹图谱技术对健康女性阴道菌群多样性的初步分析

本文刊于: 《北京大学学报(医学版)》 年第期

利用 DNA 指纹图谱技术对健康女性阴道菌群多样性的初步分析
摘要
     目的:利用 DNA 指纹图谱技术—变性梯度凝胶电泳(denaturinggradient gel electrophoresis, DGGE)分析我国育龄期及绝经期健康女性阴道菌群多样性,研究结果不仅为了解各种下生殖道感染疾病状态下的微生态环境奠定基础,同时为研制适合恢复中国女性正常阴道微生态环境的微生态制剂提供依据。方法: 选取 2009 年 10 月至 2010 年 1 月在北京大学第一医院妇产科门诊常规体检的健康女性(其中育龄期 30 例、绝经后 30 例)为研究对象。采集阴道分泌物,提取细菌总 DNA,采用通用引物对细菌 16S rDNA 基因的 V3 区进行扩增,将PCR产物进行变性梯度凝胶电泳,通过对DGGE特征条带切胶回收并进行克隆测序,利用 GenBank 中的 Blast 与已知序列比对,鉴定细菌菌种,分析不同生理状态下阴道菌群的多样性。结果: (1)我国育龄期健康女性阴道常见菌种为:卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、惰性乳杆菌(Lactobacillus iners)和加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri),其中惰性乳杆菌是以往通过传统培养方法没有认识到的阴道优势菌种。(2)绝经期健康女性阴道菌种与育龄期不同且复杂,常见菌种有:惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌、大肠杆菌(Escherichia coli)、韦荣球菌(Veillonella sp)、中间链球菌(Streptococcus intermedius)、咽颊炎链球菌(Streptococcus anginosus)、普雷沃氏菌属(Prevotella sp)、气球菌属(Anaerococcus lactolyticus)和脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)。结论:通过 DGGE 分析发现我国育龄期健康女性阴道常见优势菌种为:卷曲乳杆菌、惰性乳杆菌、加氏乳杆菌;绝经期健康女性阴道常见优势菌种为:惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌、大肠杆菌、链球菌属、普雷沃菌属、脆弱拟杆菌以及产乳酸的韦荣球菌、气球菌属,并首次发现在不同生理状态下惰性乳杆菌均是阴道优势菌种之一。


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