双酚A对小鼠卵巢腔前卵泡颗粒细胞凋亡和卵巢发育的影响

本文刊于: 《南方医科大学学报》 2021年第0期

关键词:
双酚A 卵巢 腔前卵泡颗粒细胞 线粒体膜电位

Keywords:
bisphenol A,ovary,preantral follicular granulosa cells,mitochondrial membrane potential
摘要
     目的探索环境雌激素双酚A(BPA)对小鼠卵巢腔前卵泡颗粒细胞凋亡和卵巢发育的作用及机制。方法选取10 d ICR雌性小鼠,分离小鼠卵巢腔前卵泡颗粒细胞进行体外培养。予以不同浓度(0、1、10、50、100、150、200和500μmol/L)BPA处理卵巢腔前卵泡颗粒细胞,CCK-8方法检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期、凋亡和线粒体膜电位变化,Western blot检测Bcl-2、Bax、p53和CyclinD1蛋白表达水平。根据对腔前卵泡颗粒细胞效应显著的BPA浓度灌胃处理ICR孕鼠1周,记录孕鼠的体质量变化,子代出生以后分别取10、17、21和42 d子代雌鼠卵巢组织称质量,然后进行卵巢组织切片HE染色及显微镜形态学观察,qPCR检测Bcl-2 mRNA水平。结果与对照组比较,低浓度BPA(50μmol/L)通过增加线粒体膜电位来抑制卵巢腔前卵泡颗粒细胞凋亡,进而促进细胞增殖(P<0.05);高浓度BPA(200μmol/L)通过减弱线粒体膜电位来促进卵巢腔前卵泡颗粒细胞凋亡,进而抑制细胞增殖(P<0.05)。低浓度BPA(50μmol/L)和高浓度BPA(200μmol/L)对卵巢腔前卵泡颗粒细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2(P<0.01)、Bax(P<0.05)和p53(P<0.05)表达具有相反效应。体内实验表明,BPA(10和35 mg/kg)处理导致孕鼠体质量增加较快及子代雌鼠卵巢指数发生变化,Bcl-2 m RNA表达与子代卵巢指数变化趋势相似,并且高浓度BPA(35 mg/kg)能够促使子代雌鼠21 d时卵泡发育加速进入有腔卵泡阶段。结论 BPA对卵巢腔前卵泡颗粒细胞功能调控具有浓度依懒性,并对孕鼠和子代雌鼠早期卵巢发育具有潜在影响。

基金项目:
国家自然科学基金(81801516);安徽省自然科学基金(2008085QC111);安徽省高校优秀拔尖人才培育项目(gxyq2020021);蚌埠医学院“512人才培育计划”(by51201207)~~

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